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WB服务

      一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质(或酶)。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要标志。检测蛋白质的方法很多,除ELISA法外,也可用与检测DNA和RNA相类似的印迹方法。前两法有“南”和“北”之意,故本法遂被延伸称为Western(西)印迹法,该法能用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分辨出与专一抗血清结合的专一性蛋白质。将聚丙烯酰胺凝胶上分辨出的蛋白质转移到硝酸纤维素膜或PVDF膜上并与第一抗体共孵。第一抗体专一地与待分离蛋白质的抗原决定簇结合,然后用另一种蛋白质,如135I-蛋白A或辣根过氧化物酶连接的山羊抗IgG(二抗)检测已结合上去的抗体。

 

服务要求:

1. 样本要求:

1.1请您提供新鲜的且尽量多的材料:

组织样本:≥50mg;

细胞样本:≥106个;

抗凝全血样本:2-5ml。

1.2或者不低于上述质量的蛋白裂解液,我们会对蛋白裂解液进行质检,质检合格方进行正常检测。这里提醒您提前蛋白一定要加蛋白酶抑制剂(更有包括磷酸酶抑制剂)

1.3 如果是低温保存的样本,-20℃保存的样本最好不要超过2个月,-80℃保存的样本不要超过6个月,液氮保存的样本不要超过1年。如果您的样本超出上述时限,造成随后的实验失败,我们不承担责任。(当然,我们也并未肯定超出时限的样本肯定实验失败)。

 

2. 蛋白信息:

2.1请您提供背景资料,包括目的蛋白的分子量大小,是否膜蛋白,参考文献等.

2.2请您提供一抗(包括一抗来源、稀释倍数等),也可由我们为您代购,我们代理多个品牌的国内外抗体供您选择。

 

操作步骤:

1. 蛋白样品制备及含量测定。

2. SDS-PAGE电泳。

3. 转膜及免疫反应。

4. 化学发光,显影,定影。

5. 凝胶图象分析:拍照、半定量分析

 

实验数据提供:

提供详细的实验报告(包括详细的试剂、仪器、实验条件、操作步骤等)、半定量数值结果(光密度值)及照片,原始胶片。

我们提供的均为客观的原始数据,不对这些数据的意义做统计分析;如您有统计方面的要求,请在签署合同时知会我们。

 

友好提示:

1.样品须低温存放送至本公司(新鲜全血需分离淋巴细胞的请在12个小时内分离),并请提前一周告知。

2.由于本公司业务巨大,实验样本存放空间有限,所以我们不对实验剩余样品进行永久保存。请客户于实验结题后1个月内决定样本是送回还是销毁,如无告知,我们会在实验结题后1个月时通知您,实验结题后2个月时我们一并销毁,不再另行通知。

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