All-in-One™ miRNA qRT-PCR 系列试剂盒包括All-in-One™ miRNA qRT-PCR Detection Kit(miRNA检测试剂盒)、All-in-One™ miRNA First-Strand cDNA Synthesis Kit(miRNA逆转录试剂盒)和All-in-One™ miRNA qPCR Kit(miRNA定量试剂盒)。本系列产品与All-in-One™ Validated miRNA Primers 或者 miProfile™ miRNA qPCR Arrays配套使用,可用于miRNA表达量的高效检测。
由Poly A聚合酶、逆转录酶,以及专为All-in-One™试剂特别研发的PAP/RT反应缓冲液组成的一种新颖的、优化的反转录混合试剂,使以上两种用于成熟miRNA逆转录(cDNA合成)反应的酶获得最佳活性。
All-in-One™ qRT-PCR Detection Kit包括RT(逆转录)和qPCR(定量检测)两部分试剂,利用基于SYBR® Green的qPCR技术,可对低至20 pg的Total RNA(或者低至10 pg的small RNA)进行快速、准确定量。
图1. All-in-One™ miRNA qRT-PCR Detection Kit的实验流程。在3'poly A加尾反应后,M-MLV逆转录酶和一种独特的Oligo dT Adaptor primer从3'端开始进行逆转录;以All-in-One™ miRNA qPCR primer和Universal Adaptor PCR Primer作为上下游引物,试剂盒中包含SYBR® Green I的qPCR Mix对经过反转录的miRNA进行特异检测。